Repository of Research and Investigative Information

Repository of Research and Investigative Information

دانشگاه علوم پزشکی و خدمات بهداشتی درمانی زنجان

Thesis #7044

[error in script] (1391) اثر جنیستین و ایماتینیب به تنهایی وترکیب با هم برتوقف چرخه سلولی در سلولهای K562و Kcl22 دارای کروموزوم فیلادلفیا. پایان نامه مقطع Masters.

[img] Text
ابراهیم عزیزی.pdf - Published Version

Download (902kB)
[img] Text
ابراهیم عزیزی فایل کامل.pdf - Published Version
Restricted to Repository staff only

Download (2MB)

Persian Abstract

مقدمه: لوسمی بیماری است که از تکثیر بدخیم سلولهای هماتوپوئتیک یا لمفوئید ناشی میشود.. لوسمی حاد لنفوبلاستیک (ALL) در اثر تجمع لنفوبلاستها در مغز استخوان ایجاد شده و شایعترین بدخیمی دوران کودکی بین سنین 3تا7 سالگی میباشد. لوسمی میلوییدی مزمن (CML) بیماری است که خصوصیات هماتولوژیکی و سیتوژنتیک و ژنتیک مولکولی بخصوصی را دارد.CML عمدتا یک بیماری رده بزرگسالان است(55 تا 45 سال).از نشانه های هر دو سرطان ALL و CML وجود ناهنجاری ژنتیکی به نام کروموزوم فیلادلفیا است. کروموروم فیلادلفیا ناشی از جابجایی کروموزومی t(9:22)(q34:q11) میباشد.جابجایی کروموزومی بین کروموزومهای 9 و22 موجب میگردد که قسمتی از انکوژن ABL1 حرکت نموده ودر کنار ژن BCR بر روی کروموزوم 22 قرار میگیرد.برعکس قسمتی از کروموزوم 22 نیز حرکت نموده به کروموزوم شمار 9 منتقل میشود. کروموزوم غیر طبیعی 22 به کروموزوم فیلادلفیا موسوم است. داروي ايماتينيب نوعي داروي خوراكي است كه خاصيت مهم اين دارو مهاركنندگي فعاليت تيروزين كينازي حاصل از ژن تركيبي BCR / ABI ايجاد شده در كروموزوم فيلادلفيا میباشد..دربعضی از بیماران بعد از مصرف ایماتینیب عود مجدد بیماری دیده میشود. جنیستئین " Genistein " یکی از ایزوفلاوون های موجود در دانه های سویا و...است که مهمترین عملکرد ان مهارکنندگی فعالیت تیروزین کیناز و القاء توقف چرخه سلولی در مرحله G2 میباشد..امید به این است که با استفاده همزمان از ایماتینیب و جنیستئین بتوان سلولهای لوسمیک دارای کروموزوم فیلادلفیا ی بیشتر و همچنین سلولهایی که عود مجدد بیماری را نشان میدهند را مهار کرد.روشها: جهت بررسی تاثیر داروی خوراکی ایماتینیب مزیلات و عصاره گیاهی جنیستئین به تنهایی و ترکیب با هم بر سلولهای لوسمیک دارای کروموزوم فیلادلفیا k562,kcl22,ccrf-cem. و برای نشان دادن بهترین دوزی که مانع از رشد سلولی میشود از تست MTT assay استفاده شد.. هم چنین تستLDH assay برای بررسی توکسیک بودن دارو مورد استفاده قرار گرفت.. برای اندازه گیری فعالیت اپپتوز تست Caspase assay بکار رفت و برای بررسی بیان ژنهای Cdc2,Cdc25c,P1,P53 در توقف چخه سلولی در مرحله G1 و G2 از Real time PCR استفاده شد نتيجه گيري و پيشنهادات:: استفاده همزمان ایماتینیب و جنیستئین باعث افزایش اپپتوزو مهار تکثیر سلولی و افزایش ازادسازی LDH وهمچنین باعث افزایش بیان ژنی P53,P21.Cdc2 و کاهش بیان ژنی Cdc25c و درنتیجه توقف چرخه سلولی در مرحله G2 میشود. نتایج دلالت بر این دارد که مهار چرخه سلولی والقاء اپپتوز مهمترین مکانیسمهایی هستند که در استفاده همزمان ایماتینیب و جنیستئن ایجاد میشود.

Title

Effects of Imatinib and Genistein co-treatment on cell cycle arrest in Philadelphia positive k562 and kcl22cell lines.

Abstract

Back ground: Presence of the philadelphia (Ph) chromosome resulting from fusion of the non-receptor tyrosine kinase abelson murine leukemia (ABL) on chromosome 9 with breakpoint cluster region protein (BCR) on chromosome 21 is the hallmark of hronic myelogenous leukemia (CML) and 20-30% of acute lymphoblastic leukemia (ALL). Imatinib Mesylate (Gleevec) is an oral potent competitive inhibitor of ABL that has the ability to induce hematologic and cytogenetic remission in Ph positive CML and ALL patients. Protein studies have demonstrated that BCR-ABL gene amplification, point mutations in the ATP binding pocketof the BCR-ABL, gene increased expression of BCR-ABL protein, upregulation of P-glycoprotein belonging to ABC transporter family, may be involved in the acquisition of resistance to imatinib. Thus long term remission is not obtained with imatinib treatment alone. Flavonoids like Genistein are polyphenolic compounds that are ubiquitously in plants. The biochemical mechanisms behind the effect of Genistein have been reported to include its interaction with the estrogen receptors, its action as an antioxdant, inhibition of topoisomerase 2, cell cycle arrest at G2 and inhibition of PTK activities as well as Gleevec.Therefore the combination of Imatinib and Genistein might be effective for reducing the number of BCR-ABL positive leukemia cells. Method: The leukemic Ph positive K562 and KCL22 cell lines, were used to investigate the effect of Imatinib and Genistein co-treatment. The leukemic Ph negative CCRF-CEM cell line was used as control. The MTT proliferation assay, LDH cytotoxicity assay, real time quantitative RT-PCR and caspase assay were used to investigate the effect of Imatinib and Genistein co-treatment on cell survival, cellular toxicity, gene expression studies. Results: Genistein and Imatinib co-treatment results to increased apoptosis, suppressed cell proliferation, increased LDH release, unregulated P53 and P21 and Cdc2 gene expression, and decreased Cdc25c in a dose dependent manner. Conclusion: The results indicate that induction of apoptosis and blockage of the cell cycle were major mechanisms of the synergistic inhibitory effect of Imatinib and Genistein co-treatment.

Item Type: Thesis (Masters)
Keywords: Philadelphia chromosome, Imatinib, Genistein, CML, ALL
Subjects: QU Biochemistry. Cell Biology and Genetics > QU 300-560 Cell Biology and Genetics
Divisions: Education Vice-Chancellor Department > Faculty of Medicine > Department of Basic Science > Department of Molecular Medicine and Genetics
Number of Pages: 120
Depositing User: خانم گیتی شاه محمدی
URI: http://repository.zums.ac.ir/id/eprint/7044

Actions (login required)

View Item View Item