Repository of Research and Investigative Information

Repository of Research and Investigative Information

دانشگاه علوم پزشکی و خدمات بهداشتی درمانی زنجان

Thesis #6715

[error in script] (1392) راه اندازی تست تشخیص مولکولی سریع، برای شناسایی استافیلوکوکوس اورئوس¬های مقاوم به متی¬سیلین در پرسنل بیمارستان¬های آموزشی¬درمانی دانشگاه علوم پزشکی زنجان با استفاده از تکنیک Multiplex PCR. پایان نامه مقطع Doctoral.

[img] Text
مهدی حاصلی.pdf - Published Version

Download (407kB)
[img] Text
مهدی حاصلی فایل کامل.pdf - Published Version
Restricted to Repository staff only

Download (2MB)

Persian Abstract

مقدمه: استافیلوکوکوس اورئوس یکی از پاتوژن¬های خطرناکی می¬باشد که عامل بسیاری از بیماری¬های عفونی می¬باشد. لذا تشخیص، کنترل، شناسایی دقیق و درمان بیماری¬های ناشی از این باکتری بسیار حائز اهمیت می¬باشد. هدف از این مطالعه، راه¬اندازی روشی سریع برای تشخیص به موقع جهت ارائه راهکار لازم برای مقابله با باکتری استافیلوکوکوس¬ اورئوس می¬باشد. مواد و روش¬ها: در این مطالعه، از کارکنان شاغل در بیمارستان¬های آموزشی و درمانی شهر زنجان به روش تصادفی نمونه¬گیری انجام شد. پس از انجام تست¬های شناسایی و تایید باکتری مورد نظر، جهت انجام آنتی¬بیوگرام از محیط کشت مولر¬هینتون¬آگار ¬به¬ روش¬کربی بایر استفاده شد. پس از استخراج DNA به روش جوشان (Boiling) و روش فنل کلروفورم ژن¬های femA، mecA و SA442 (قطعه¬ای از کروموزوم اختصاصی باکتری) به طور همزمان با دستگاه ترموسایکلر تکثیر شده و پس از انجام ژل الکتروفورز و رنگ-آمیزی با Syber GreenDNA باند¬ها شناسایی شدند. یافته¬ها: 185 نمونه کاتالاز مثبت، و 65 نمونه کوآگولاز مثبت گزارش شدند. نتایج حاکی از تست آنتی-بیوگرام نشان داد که باکتری استافیلوکوکوس اورئوس به آنتی¬بیوتیک¬های اگزاسیلین و پنی¬سیلین بیشترین مقاومت و به کلیندامایسین و ونکومایسین بیشترین حساسیت را دارد. با بهینه¬سازی شرایط PCR ژن¬های femA، mecA و SA442 در یک میکروتیوب به صورت Multiplex تکثیر شدند. بحث و نتیجه¬گیری: روش Multiplex PCR به عنوان یک تست سریع و دقیق در مقایسه با روش دیسک دیفیوژن می¬تواند در شناسایی استافیلوکوکوس اورئوس¬های مقاوم به متی¬سیلین کمک کننده باشد.

Title

Setting up a molecular technique for rapid detection of methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) in staff of University Hospitals from Zanjan province by multiplex PCR

Abstract

Introduction: Staphylococcus aureus is one of the pathogens that is a major agent of infectious diseases. So detection, control and treatment of this pathogen is very important. The objective of this study is setting up a fast method to detect methicillin resistant Staphylococcus aureus (MRSA) for better management of diseases related to this pathogen. Materials and methods: In this study 225 sample collected form staff of University hospitals of Zanjan province. After detection and confirmation of bacteria by conventional and biochemical methods, antimicrobial susceptibility was tested by disk diffusion (Kirby-Bauer) method. After DNA extraction by boiling method, Sa442, mecA and femA genes were detected by multiplex PCR and PCR products products were analyzed by electrophoresis (70V, 30 min) in gels composed of 1.5% (w/v) agarose stained with SyberGreen. Result: 208 out of 225 samples made colony in bacterial culture mediom. 203/208 isolates were gram positive; 201/208 isolates were catalase positive and 71/208 isolates were coagulase positive. Most of the isolates were resistant to oxacillin and penicillin. By optimization of PCR conditions, Sa442, mecA and femA genes were detected by multiplex PCR simultaneously in single reaction tube. Discussion: Multiplex PCR can detect rapidly and selectively methicillin resistant Staphylococcus aureus in comparison with disk diffusion method.

Item Type: Thesis (Doctoral)
Keywords: Staphylococcus aureus, mecA, femA, MRSA, Mutiplex PCR
Number of Pages: 91
Depositing User: خانم گیتی شاه محمدی
URI: http://repository.zums.ac.ir/id/eprint/6715

Actions (login required)

View Item View Item