Repository of Research and Investigative Information

Repository of Research and Investigative Information

دانشگاه علوم پزشکی و خدمات بهداشتی درمانی زنجان

تشخيص کلوناليتي در کودکان مبتلا به لوسمي لنفوبلاستي حاد از نوع پيش سازهاي B با ارزيابي بازآرايي ژن زنجيره سبک (کاپا) و سنگين ايمونوگلوبولين

(1385) تشخيص کلوناليتي در کودکان مبتلا به لوسمي لنفوبلاستي حاد از نوع پيش سازهاي B با ارزيابي بازآرايي ژن زنجيره سبک (کاپا) و سنگين ايمونوگلوبولين. علوم پزشكي دانشگاه آزاد اسلامي.

[img] Text
69913854301.pdf

Download (321kB)

Official URL: https://www.sid.ir/fa/journal/ViewPaper.aspx?id=59...

Persian Abstract

سابقه و هدف: بازآرايي قطعات ژني در مسير تكاملي لنفوسيت هاي B و T تنوع زيادي در مولكولهاي زنجيره سبک (کاپا) و سنگين دارد. در لوسمي هاي لنفوئيد از نوع B-precursor ALL بازآرايي ژن زنجيره سنگين به عنوان شايعترين و بازآرايي ژن زنجيره سبک کاپا نيز در BP-ALL به ميزان نسبتا شايع گزارش شده است. هدف از مطالعه حاضر بررسي الگوي بازآرايي ژنهاي زنجيره سبک (کاپا) و سنگين ايمونوگلوبولين در ALL كودكان از نوع پيش سازهاي B توسط واكنش زنجيره پليمراز (PCR) مي باشد. روش بررسي: در مطالعه تجربي حاضر 183 كودك با تشخيص اوليه ALL قبل از شروع درمان مورد بررسي قرار گرفتند. پس از ارزيابي مورفولوژي L2=%41) و (L1=%44 و ايمونوفنوتيپ تنها 140 بيمار با تشخيص B-precursor ALL براي مطالعه انتخاب شدند. پس از استخراج DNA آزمايش PCR به منظور تکثير منطقه خيلي متغير CDRIII) IgH و CDRI) وIgk با استفاده از پرايمرهاي مشترک انجام شد. محصولات PCR پس از آناليز هترودوپلكس والكتروفورز برروي ژل پلي آكريلاميد و رنگ آميزي نقره مورد بررسي قرار گرفت. آناليز آماري با برنامه نرم افزاري version 11.5) SPSS) انجام شد. يافته ها : (%90.4) 114 نفر از بيماران داراي بازآرايي كلونال درژن IgH با استفاده از پرايمرهاي مشترک نواحي CDR-III و CDR-I بودند (منوكلونال %57.8، باي كلونال %34.9 و اوليگوكلونال %5.5). 4 بيمار از 9 بيمار مبتلا به (4/44%) TALL داراي بازآرايي كلونال IgH بودند. الگوي کلونال Igk-Kde در (%67) 59 بيمار از موارد BP-ALL وجود داشت (10% باي کلونال). بيشترين بازآرايي مربوط به گروه (25%) VKI و (%22.7) VKIII بود. نتيجه گيري: الگوي کلونال ژن IgH مشابه جوامع ديگر بود. استفاده توام از پرايمرهاي FRI و FR III در يك واكنش بصورت Multiplex PCR كه براي اولين بار گزارش مي شود علاوه بر افزايش تشخيص بازآرايي IgH، زمان رسيدن به نتيجه را كاهش داده و وجود بازآرايي را مي توان توسط هر دو تاييد كرده و از منفي كاذب جلوگيري نمود. الگوي کلونال Igk-Kde کمي بيش از گزارشهاي قبلي بوده و شايعترين بازآرايي (%25) VkI بود. هيچ ارتباط معني داري بين انواع مختلف بازآرايي و متغيرهاي کمي وجود نداشت.

Title

MOLECULAR DIAGNOSIS OF CLONALITY IN B-PRECURSOR ACUTE LYMPHOBLASTIC LEUKEMIA OF CHILDREN USING IMMUNOGLOBULIN HEAVY AND KAPPA LIGHT CHAIN GENE REARRANGEMENTS

Abstract

Background: Enormous diversities of heavy chain immunoglobulin (IgH) & IgK molecules are generated during B- and T-lymphocyte differentiation through the rearrangement of gene segments. Additionally, random insertion and deletion of nucleotides between gene segments make unique sequences which are cell or clone specific. IgH and IgK gene rearrangements are the most and relatively common reported rearrangements in B-precursor acute lymphoblastic leukemia, respectively. The purpose of this study is to evaluate the pattern of IgH and IgK gene rearrangements using polymerase chain reaction (PCR) in BP-ALL in Iranian children. Materials and methods: For this prospective study, bone marrow aspirates of 183 patients with the diagnosis of acute leukemia were collected at admission before any chemotherapy. Having reviewed cytomorphology (L1:44%, L2:41%) and immunophenotyping, only 140 cases with the diagnosis of B-precursor ALL were selected. Mononuclear cells including leukemic blasts were isolated by density gradient. Having DNA extracted, hyper-variable regions of IgH and IgK were amplified by consensus primers using PCR. PCR products were analyzed after heteroduplex analysis and polyacrylamide gel electrophoresis (silver stain). The DNA sequences were compared and aligned to the sequences homologous for IgH and IgK published by Gene Bank. Results: IgH gene rearrangements were found in 114 (90.4%) of patients using consensus primers for CDR-III and CDR-I regions (monoclonal 57.8%; biclonal 34.9%; oligoclonal 5.5%). Four of nine patients with T-ALL had clonal rearrangements of IgH. Clonal pattern of Igκ-Kde were present in 59 (67%) of cases (biclonal 10%). VKI (25%) and VKШ (22.7%) were the most common type of rearrangements. Conclusion: Clonal rearrangement pattern of IgH gene was similar to other populations. Using FRI and FRIII primers in multiplex PCR increased the rate of detection and reducing turnaround time. IgK was slightly more frequent than previous reports while VKI (25%) was the most common type.

Item Type: Article
Keywords: GENE REARRANGEMENT, CLONALITY , ACUTE LYMPHOBLASTIC LEUKEMIA
Journal or Publication Title: علوم پزشكي دانشگاه آزاد اسلامي
Abstract and Indexing: ISC
Depositing User: خانم گیتی شاه محمدی
URI: http://repository.zums.ac.ir/id/eprint/4362

Actions (login required)

View Item View Item